生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武第四章 蛋白质的性质分类及研究方法生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武提纲一、蛋白质的理化性质二、蛋白质的研究方法三、蛋白质的分类生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武蛋白质的理化性质紫外吸收：最大吸收峰为280nm两性解离：蛋白质的pI值不能直接计算，只能使用等电聚焦等方法进行测定胶体性质沉淀反应：盐析、pI 沉淀、有机溶剂引起的沉淀和重金属盐作用造成的沉淀变性、复性水解颜色反应生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武蛋白质变性蛋白质受到某些理化因素的作用，其高级结构受到破坏、生物活性随之丧失的现象。导致蛋白质变性的物理因素有：加热、冷却、机械作用、流体压力和辐射；化学因素有强酸、强碱、高浓度盐、尿素、重金属盐、疏水分子和有机溶剂。蛋白质变性以后，其理化性质发生一系列的变化。这些变化可以作为检测蛋白质变性的指标。主要的变化包括：（1）溶解度降低。（2）黏度增加。（3）生物活性丧失。（4）更容易被水解。（5）结晶行为发生变化。生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武蛋白质的水解蛋白质在强酸、强碱或蛋白酶的催化下均能够发生水解。但需要注意的是，酸水解会破坏几种氨基酸，特别是Trp几乎全部被破坏，其次是三种羟基氨基酸。另外Gln和Asn在酸性条件下，容易水解成Glu和Asp；碱水解会导致多数氨基酸遭到不同程度的破坏，并且产生消旋现象，但不会破坏Trp；酶水解效率高、不产生消旋作用，也不破坏氨基酸，但不同的蛋白酶对肽键特异性不一样。生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武四种羧肽酶来源和特异性生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武几种蛋白酶特异性的比较生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武蛋白质的各种颜色反应生物竞赛-生物化学原理（结构生物化学）-南京大学杨荣武蛋白质研究方法假定你发现一种新的蛋白质：蛋白质X1. 如何得到这种蛋白质? 蛋白质的分离、纯化技术2. 这种蛋白质的大小？ （SDS-PAGE）3.它的pI是多少？ （等电聚焦）4. 其他细胞或其他生物体内是